上海百蕊生物科技有限公司

大鼠elisa試劑盒現(xiàn)貨銷售
elisa試劑盒組成：
試劑盒組成
說(shuō)明書(shū)
1份
封板膜
2片
密封袋
1個(gè)

酶標(biāo)包被板
標(biāo)準(zhǔn)品
0.5ml×1瓶
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5ml×1瓶
酶標(biāo)試劑
3 ml×1瓶
樣品稀釋液
3 ml×1瓶

顯色劑A液
3 ml×1瓶
顯色劑B液
3 ml×1瓶

終止液
3ml×1瓶

濃縮洗滌液
20ml×1瓶

elisa試劑盒自備材料：
1. 酶標(biāo)儀。
2. 自動(dòng)或者手工洗板機(jī)。
3. 恒溫箱。
4. 可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測(cè)樣品較多時(shí)，最好用多通道移液器。
5. 干凈的試管和Eppendof管。

elisa試劑盒操作步驟：
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照?qǐng)D表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、 待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl， 然后再加待測(cè)樣品 10μl（樣品最終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡 量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

elisa試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制注意事項(xiàng)：
1、樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來(lái)的，所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事，否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)從談起。
2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度，即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限。而對(duì)于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線，盡量要使實(shí)驗(yàn)樣品的濃度在中間坡度最陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。
3、最好采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度，ELISA試劑盒這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會(huì)出現(xiàn)較大的偏離。
4、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)樣品時(shí)，應(yīng)按濃度遞增順序進(jìn)行，以減少高濃度對(duì)低濃度的影響，提高準(zhǔn)確性。
5、標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個(gè)點(diǎn)，但至少要保證有5個(gè)點(diǎn)。
6、做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒?yàn)要求不同而有所變動(dòng)，但一般來(lái)說(shuō)，相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98，對(duì)于有些實(shí)驗(yàn)，至少要0.99甚至是0.999.

elisa試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線選擇什么擬合方程：

1.在S曲線的低濃度部門(mén)可以用乘冪方程很好的擬合，中低濃度部門(mén)可以用直線方程，中間部門(mén)可用對(duì)數(shù)方程，而中后段可用四參數(shù)。免疫檢測(cè)時(shí)尺度點(diǎn)（可以是倍比稀釋的，也可以不是）濃度假如和相應(yīng)的吸光度（OD）值假如能夠呈現(xiàn)直線關(guān)系當(dāng)然是最理想的了，這時(shí)可以通過(guò)EXELL等利便的獲得擬合曲線，進(jìn)而推算出樣品的濃度值。

2.關(guān)于尺度曲線的擬合方式，直線、二次曲線、三次曲線、指數(shù)、對(duì)數(shù)等雖都可用于ELISA及其它生物學(xué)反應(yīng)中的曲線擬合，但都只合用于曲線的一部門(mén)，有的合用于前半段，有的合用于后半段，有的合用于中間一段，而Logistic曲線則對(duì)曲線的全部都有較好的合用性。

3.在一個(gè)長(zhǎng)的區(qū)間內(nèi)，Logistic應(yīng)該都能擬合得較為理想。假如用來(lái)定量，S形曲線的中間段（較陡處）是比較好的，而兩真?zhèn)€平坦部門(mén)計(jì)算誤差會(huì)大，有時(shí)甚至?xí)艽?。用于免疫檢測(cè)的所謂“尺度曲線"實(shí)在稱為擬合曲線比較合適。目前國(guó)際上最流行的免疫檢測(cè)擬合方



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