北京中建北方環(huán)境科技有限責任公司

 細胞培養(yǎng)室的設(shè)置、設(shè)備和準備工作一、細胞培養(yǎng)實驗室的設(shè)置及設(shè)備（一）細胞培養(yǎng)實驗室的設(shè)置組織細胞培養(yǎng)技術(shù)與其他一般實驗室工作的主要區(qū)別在于要求保持無菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。目前，超凈工作臺的廣泛使用，很大程度上方便了組織細胞培養(yǎng)工作，并使一些常規(guī)實驗室有可能用于進行細胞培養(yǎng)。細胞培養(yǎng)實驗室應能進行六方面的工作：無菌操作、孵育、制備、清洗、消毒滅菌處理、儲藏。
1．無菌操作區(qū)
（1）無菌操作室：無菌操作區(qū)只限于細胞培養(yǎng)及其他無菌操作的區(qū)域，最好能與外界隔離，不能穿行或受其他干擾。理想的無菌操作室應劃為三部分：
a) 更衣室—―供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
b) 緩沖間—―位于更衣間與操作間之間，目的是為了保證操作間的無菌環(huán)境，同時可放置恒溫培養(yǎng)箱及某些必需的小型儀器。
c) 無菌操作間—―專用于無菌操作、細胞培養(yǎng)。其大小要適當，且其頂部不宜過高（不超過2.5m）以保證紫外線的有效滅菌效果；墻壁光滑無死角以便清潔和消毒。工作臺安置不應靠墻壁，臺面要光滑壓塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀察。無菌操作間的空氣消毒：紫外線燈—－產(chǎn)生臭氧，并且室內(nèi)溫度及濕度均較高，不利于工作人員健康?？諝膺^濾的恒溫恒濕裝置—－最好。表1潔凈室（區(qū)）空氣潔凈度級別表潔凈度級別 塵粒最大允許數(shù)／立方米 微生物最大允許數(shù) 浮游菌／立方米 沉降菌／皿
100級 3,500  0  5 1
10000級 350,000  2,000 100  3
100000級 3,500,000  20,000 500  10
300000級 10,350,000  60,000 -  15無臭氧紫外線消毒器電子消毒滅菌器—－在高壓電場作用下，電子管的內(nèi)外電極發(fā)生強烈電子轟擊，使空氣電離而將空氣中的氧轉(zhuǎn)換成臭氧。臭氧是一種強氧化劑，能同細菌的胞膜及酶蛋白氫硫基進行氧化分解反應，從而靠臭氧氣體彌漫性擴散達到殺菌之目的，消毒時沒有死角。消毒后空間的殘留臭氧只需30～40min即能自行還原成氧氣，空氣不留異味，消毒物體表面不留殘毒。（2）凈化工作臺：操作簡單，安裝方便，占用空間小且凈化效果很好。一般細菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺主要有兩種：a)側(cè)流式或稱垂直式b)外流式或稱水平層流式。凈化工作臺工作原理（大致相同）—－通常是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過濾器初濾，由離心風機壓入靜壓箱，再經(jīng)高效空氣過濾器精濾，由此送出的潔凈氣流以一定的均勻的斷面風速通過無菌區(qū)，從而形成無塵無菌的高潔凈度工作環(huán)境。